Question

7．根據各類微生物的形態(tài)結構特點和新陳代謝類型，利用選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，結合顯微鏡檢，以及菌落特征，可以把混雜在一起的大腸桿菌、硝化細菌、乳酸菌、酵母菌、圓褐固氮菌分離開來．下面是分離篩選的方法、步驟，請根據各個步驟的條件，填寫空格中的內容．首先配制一系列不同性質的固體培養(yǎng)基，然后進行高溫滅菌．再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養(yǎng)基上培養(yǎng)．
（1）用無氮培養(yǎng)基可篩選出圓褐固氮菌．
（2）用不含有機碳源的選擇培養(yǎng)基可篩選出硝化細菌．
（3）酵母菌的篩選需要在常規(guī)培養(yǎng)基中另外加入某種抗生素，如青霉素．
（4）利用伊紅和美藍培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌，菌落呈紫黑（或深紫或黑色）色并帶有金屬光澤的是大腸桿菌，挑取該菌落單獨培養(yǎng)，結合顯微鏡檢和進一步用伊紅和美藍培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)來確定．
（5）在無氧環(huán)境下培養(yǎng)混合菌，大腸桿菌、乳酸菌、酵母菌可以生長，加入一定濃度的乳酸，使培養(yǎng)基pH充分降低，可抑制大腸桿菌和酵母菌的生長，利用菌落特征，結合顯微鏡檢，選取生長優(yōu)勢的菌落，即可分離出乳酸菌．

Answer 1

分析 選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質和環(huán)境不同．有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；例如從土壤中分離放線菌時，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細菌和真菌的生長；如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽．

解答 解：（1）培養(yǎng)基的主要成分包括水、無機鹽、碳源、氮源，因此無氮培養(yǎng)基可篩選出能固氮的微生物，即圓褐固氮菌．
（2）不含有機碳源的選擇培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)型微生物，即硝化細菌．
（3）酵母菌是真菌，篩選時常在培養(yǎng)基中加入抗生素，防止其他細菌的生長．
（4）利用伊紅和美藍培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)和鑒定大腸桿菌，菌落呈黑色并帶有金屬光澤．
（6）無氧條件下大腸桿菌、乳酸菌和酵母菌可以生長，加入一定濃度乳酸可以抑制大腸桿菌和酵母菌的生長，利用菌落特征，結合顯微鏡檢，選取生長優(yōu)勢的菌落，即可分離出乳酸菌．．
故答案為：
（1）圓褐固氮菌
（2）硝化細菌
（3）某種抗生素，如青霉素
（4）紫黑（或深紫或黑色）　大腸桿菌
（5）大腸桿菌、乳酸菌、酵母菌　 大腸桿菌和酵母菌　乳酸菌

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠識記培養(yǎng)基的成分，掌握選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基配制的原理，識記不同微生物的代謝類型和特點．