Question

分析回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐方面的問題：
（一）微生物的培養(yǎng)技術(shù)在工農(nóng)業(yè)、醫(yī)療衛(wèi)生等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用．表為某微生物培養(yǎng)基的配方，請回答：

成    分	含     量
NaNO3	3g
K2HPO4	1g
KCl	0.5g
MgSO4?7H2O	0.5g
FeSO4	0.01g
（CH2O）	30g
H2O	1 000ml
青霉素	0.1萬單位

（1）依用途劃分，該培養(yǎng)基屬于

 

培養(yǎng)基．
（2）根據(jù)培養(yǎng)基的成分，推測所培養(yǎng)的微生物可能是

 

A．尿素分解菌   B．霉菌或酵母菌    C．病毒     D．藍藻
（3）配制培養(yǎng)基時，在各成分溶化后分裝前，需要做的工作是

 

．如果要鑒別自來水中大腸桿菌是否超標，至少還要加入瓊脂和伊紅-美藍，并且除去

 

．
（4）若要通過稀釋涂布平板法分離純化土壤中的微生物，其正確操作步驟是

 

①土壤取樣      ②稱取10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中制備水壤提取液      ③吸取0.1mL進行平板涂布      ④依次稀釋至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷的稀釋度
A．①②③④B．①③②④C．①②④③D．①④②③
（二）酶在生產(chǎn)和生活中有著廣泛的應(yīng)用．回答下面有關(guān)酶應(yīng)用的有關(guān)問題：
（1）如果手頭有兩種外觀一致又沒有包裝的加酶洗衣粉，其中一種只含一種水解酶，另一種含有多種水解酶（已知不同水解酶的相對分子質(zhì)量不同），生物老師根據(jù)洗衣粉中酶（蛋白質(zhì)）與其他成分的不同理化性質(zhì)，先除去洗衣粉中的非蛋白質(zhì)的成分，請你再運用你學(xué)過的一種生物技術(shù)幫助老師把兩種洗衣粉區(qū)分出來（只要求說出方法名稱及其簡單原理即可）：

 

．
（2）如果分別用等量的不同溫度的水（從0°C～90°C）分別溶入加酶洗衣粉（含蛋白酶）來洗滌等量的有陳舊牛奶漬的棉質(zhì)衣服，其洗滌效果用下列的哪一個坐標曲線圖來表示較合適（橫軸表示溫度，縱軸表示洗滌效果）？答：

 

 圖．

（3）應(yīng)用果膠酶能夠提高果汁產(chǎn)品的產(chǎn)量和品質(zhì)．若上圖橫軸表示果膠酶的用量，縱軸表示果汁的產(chǎn)量，則在原材料有限的情況下，能正確表示相同時間內(nèi)果膠酶的用量對果汁產(chǎn)量影響的是上面的

 

圖．
（4）要想提高酶的利用效率，可以使用固定化酶技術(shù)．下面有關(guān)該技術(shù)的說法中，正確的是

 

A．物理吸附法的優(yōu)點是操作簡單，吸附牢固
B．物理吸附法容易對酶活性產(chǎn)生影響
C．包埋法的優(yōu)點是操作復(fù)雜，條件溫和，對細胞無毒毒性
D．凝膠包埋常用的凝膠種類有瓊膠糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、明膠和聚丙烯酰胺等．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用,制備和應(yīng)用固相化酶,蛋白質(zhì)的提取和分離

專題：

分析：1、培養(yǎng)基的成分有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子．
2、影響酶促反應(yīng)速率有溫度、反應(yīng)物濃度、酶濃度等．
3、固定化技術(shù)包括包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法（交聯(lián)法），由于細胞相對于酶來說更大，難以被吸附或結(jié)合，因此多采用包埋法，固定化細胞在多步酶促反應(yīng)中發(fā)揮連續(xù)催化作用，但如果反應(yīng)底物是大分子物質(zhì)，則難以自由通過細胞膜，從而限制固定化細胞的催化反應(yīng)．固定化酶實質(zhì)上是將相應(yīng)酶固定在不溶于水的載體上，實現(xiàn)酶的反復(fù)利用，并提高酶穩(wěn)定性，酶的各項特性（如高效性、專一性和作用條件的溫和性）依然保持．

解答： 解：（一）（1）由于該表中培養(yǎng)基含有青霉素，故按用途分應(yīng)為選擇培養(yǎng)基．
（2）青霉素能抑制原核細胞細胞壁的形成，對真核細胞無影響，故霉菌或酵母菌可存活．
（3）配制培養(yǎng)基的步驟為計算→稱量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板，鑒定大腸桿菌需要加入瓊脂和伊紅-美藍，但大腸桿菌為原核生物，故還應(yīng)出去青霉素．
（4）通過稀釋涂布平板法分離純化土壤中的微生物的步驟為土壤取樣→溶解→稀釋→涂布平板→培養(yǎng)．
（二）（1）要出去蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)，應(yīng)用凝膠色譜法，利用該種方法能將相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分離出來，如果利用該法僅能洗脫出單一的蛋白質(zhì)，說明相應(yīng)的該種洗衣粉只含一種水解酶，如果利用該法能洗脫出多種蛋白質(zhì)，則說明相應(yīng)的該種洗衣粉含有多種水解酶．
（2）溫度對酶活性的影響為超過最適溫度，酶的活性都將下降，故乙圖符合條件．
（3）酶的濃度能影響化學(xué)反應(yīng)的速率，隨著酶濃度的升高，反應(yīng)速率逐漸加快，但在原材料有限的情況下，最終會達到平衡狀態(tài)，即曲線丙．
（4）固定化酶技術(shù)中由于細胞相對于酶來說更大，難以被吸附或結(jié)合，因此多采用包埋法，凝膠包埋常用的凝膠種類有瓊膠糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、明膠和聚丙烯酰胺等．
故答案為：
（一）（1）選擇    
（2）B    
（3）調(diào)整pH和進行滅菌     青霉素   
（4）C
（二）（1）凝膠色譜法．通過該種方法能將相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分離出來，如果利用該法僅能洗脫出單一的蛋白質(zhì)，說明相應(yīng)的該種洗衣粉只含一種水解酶，如果利用該法能洗脫出多種蛋白質(zhì)，則說明相應(yīng)的該種洗衣粉含有多種水解酶
（2）乙     
（3）丙   
（4）D

點評：本題綜合考查了酶的應(yīng)用、微生物的分離及培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生對所學(xué)知識的理解，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．