Question

20．將耐鹽基因?qū)�入植物�?xì)胞可使植物獲得耐鹽性狀，如圖為耐鹽轉(zhuǎn)基因玉米植株的培育過程．回答下列問題：

（1）獲得耐鹽基因后可以轉(zhuǎn)錄生成耐鹽基因的mRNA，然后在逆轉(zhuǎn)錄酶酶的作用下構(gòu)建cDNA文庫(kù)．通常用PCR技術(shù)擴(kuò)增耐鹽基因，PCR技術(shù)的原理是DNA分子雙鏈復(fù)制．過程①表示構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組DNA分子）．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞除圖示方法外，還有基因槍法、花粉管通道法，圖中一般將目的基因?qū)�入Ti質(zhì)粒的T-DNA（可轉(zhuǎn)移DNA）上．
（3）圖中過程③和④分別表示脫分化、再分化．
（4）在進(jìn)行過程④之前通常要對(duì)愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行篩選，獲得成功導(dǎo)入耐鹽基因的細(xì)胞，篩選的方法為加入一定濃度的鹽水，耐鹽基因能使植株獲得耐鹽性狀，其最可能的原因是耐鹽植株能升高（填“降低”或“升高”）植物細(xì)胞的滲透壓．

Answer 1

分析 分析圖解：圖中過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，過程②表示將含有目的基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌中，過程③表示脫分化形成愈傷組織，過程④表示再分化．

解答 解：（1）獲得耐鹽基因后可以轉(zhuǎn)錄生成耐鹽基因的mRNA，然后在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下構(gòu)建cDNA文庫(kù)．PCR技術(shù)的原理是DNA分子雙鏈復(fù)制．過程①表示構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組DNA分子）．
（2）圖示目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，除此以外還有基因槍法和花粉管通道法．Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上，因此圖中一般將目的基因?qū)�入Ti質(zhì)粒的T-DNA上．
（3）植物組織培養(yǎng)過程包括脫分化和再分化兩個(gè)步驟，圖中過程③表示脫分化，過程④表示再分化．
（4）在進(jìn)行過程④之前通常要對(duì)愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行篩選，獲得成功導(dǎo)入耐鹽基因的細(xì)胞，因此可以加入一定濃度的鹽水對(duì)導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞進(jìn)行選擇，耐鹽基因能使植株獲得耐鹽性狀，其最可能的原因是耐鹽植株能升高植物細(xì)胞的滲透壓．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄酶   DNA分子雙鏈復(fù)制   構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組DNA分子）
（2）基因槍法   花粉管通道法      T-DNA（可轉(zhuǎn)移DNA）
（3）脫分化   再分化
（4）加入一定濃度的鹽水   升高

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程和植物組織培養(yǎng)技術(shù)，要求考生能夠掌握基因工程的操作步驟以及目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法，識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過程，再結(jié)合圖示信息準(zhǔn)確答題．