Question

下列是有關(guān)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用等問題，請分析回答．
（1）圖示利用

 

法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步

 

分散到培養(yǎng)基的表面，為達到這一目的，操作上應(yīng)注意：

 

．
（2）制備培養(yǎng)基的操作順序是

 

．（用下列字母排序）
a．倒置培養(yǎng)基  b．計算c．溶化d．稱量e．滅菌
（3）現(xiàn)有5種酵母菌的營養(yǎng)缺陷型菌株1、2、3、4、5，它們不能合成生長所必需的物質(zhì)G，已知A、B、C、D、E都是合成G物質(zhì)的必需中間產(chǎn)物，但不知這些物質(zhì)合成的順序，于是在培養(yǎng)基中分別加入這幾種物質(zhì)并分析了這幾種物質(zhì)對各種營養(yǎng)缺陷型菌株生長的影響，結(jié)果如下表所示．

物質(zhì) 突變體	培養(yǎng)基中加入的物質(zhì)
	A	B	C	D	E	G
1	-	-	-	+	-	+
2	-	+	-	+	-	+
3	-	-	-	-	-	+
4	-	+	+	+	-	+
5	+	+	+	+	-	+

根據(jù)以上結(jié)果，推測這幾種物質(zhì)的合成順序應(yīng)是

 

．
（4）某同學(xué)在做微生物實驗時，不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起，請你幫助該同學(xué)完善實驗步驟，將自生固氮菌和酵母菌分離開來：
①制備兩種培養(yǎng)基，對兩種培養(yǎng)基的處理方式分別是：一種是

 

，另一種是

 

，將兩種培養(yǎng)基各自分成兩份，依次標上A，a和B，b．
②分別向A、B培養(yǎng)基中接種

 

菌，適宜條件下培養(yǎng)3-4天．
③分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌并分別接種到a和b培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)3-4天．其目的是

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對微生物的選擇作用

專題：

分析：1、分析題圖：利用平板劃線法接種，需要注意的是接種環(huán)在劃線時每次劃線前要灼燒，冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃，劃線首尾區(qū)不重疊．
2、制備培養(yǎng)基的步驟為計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板．
3、分析表格：在多種突變菌株中，如題中表格，加入某物質(zhì)后“+”最多的物質(zhì)在最后，加入某物質(zhì)后“-”最多的物質(zhì)在最前．

解答： 解：（1）圖中展示的是利用平板劃線法接種，需要注意的是接種環(huán)在劃線時每次劃線前要灼燒，冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃，劃線首尾區(qū)不重疊，目的是把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（2）制備培養(yǎng)基的步驟為計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板．
（3）由于題中給出G是必需的物質(zhì)，在5種突變菌株中只要加入G，都可以活下來，則G必然是最后的產(chǎn)物；凡是只加了E的都沒能存活，則E就是最開頭的產(chǎn)物．加A物質(zhì)，1、2、3、4均沒有存活，說明A物質(zhì)處于第二位；其他類推，C物質(zhì)處于第三位，B物質(zhì)處于第四位，D物質(zhì)處于第五位，因此這幾種物質(zhì)的合成順序應(yīng)是E→A→C→B→D→G．
（4）①將微生物進行分離一般采用選擇培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長．圓褐固氮菌是自生固氮菌，能在無氮培養(yǎng)基上生長繁殖，而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖．根據(jù)這一原理可將兩種微生物分離開來．所以分別配置 無氮（或不含氮和青霉素）的培養(yǎng)基和  加青霉素（或加青霉素和氮）的培養(yǎng)基，分別分成兩份，依次標上A、a、B、b備用．
②分別向A、B培養(yǎng)基接種混有兩種茵的樣品．
③培養(yǎng)的目的是為了分離培養(yǎng)自生固氮菌和酵母菌．
故答案為：
（1）劃線法     稀釋       ①每次劃線前要灼燒 ②冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃 ③首尾區(qū)不重疊 
（2）b→d→c→e→a
（3）E→A→C→B→D→G 
（4）無氮     含青霉素
（5）混合菌       
（6）分離培養(yǎng)自生固氮菌和酵母菌

點評：本題難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的要求，著重考查了微生物的分離與培養(yǎng)的相關(guān)知識，解答本題的關(guān)鍵是根據(jù)不同微生物的特點選擇恰當?shù)呐囵B(yǎng)基