水稻種子中70%的磷以植酸形式存在．植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動物的抗營養(yǎng)因子；同時，排出的大量磷進入水體易引起水華．
（1）磷元素除了形成植酸外，還可以出現(xiàn)在下列分子或結(jié)構(gòu)中（多選）．
A．核糖      B．ATP       C．核糖體       D．核膜
（2）種植蘆葦能有效抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與引起水華的藻類關(guān)系是．
（3）植酸酶可降解植酸，在谷物類飼料中添加植酸酶可提高飼料的利用率．
（4）酵母菌中植酸酶的活性較高．如圖是從不同類型酵母菌的發(fā)酵液中提取植酸酶的工藝流程．
據(jù)圖回答：
①植酸酶（Ⅰ/Ⅱ）屬于分泌蛋白．
②若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在．
③提純的植酸酶需做活性條件測定，如圖為測定結(jié)果．圖中的自變量可為（答一種）；因變量可以通過測定來表示．
（5）為從根本上解決水稻中的高植酸問題，可將植酸酶基因?qū)�入水稻，培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種．如圖是獲取植酸酶基因的流程．
據(jù)圖回答：
①圖中基因組文庫（小于/等于/大于）cDNA文庫．
②B過程需要的酶是；A、C過程中（可以/不可以）使用同一種探針篩選含目的基因的菌株．
③目的基因Ⅰ和Ⅱ除從構(gòu)建的文庫中分離外，還可以分別利用圖中和為模板直接進行PCR擴增，該過程中所用酶的顯著特點是．
（6）已獲得的轉(zhuǎn)植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感�。�如圖為選育低植酸抗病水稻品種的過程．圖中兩對相對性狀分別由兩對基因控制，并獨立遺傳．

采用圖中育種過程，需從代開始篩選，經(jīng)篩選淘汰后，在選留的植株中低植酸抗病純合體所占的比例是．選留植株多代自交，經(jīng)篩選可獲得低植酸抗病性狀穩(wěn)定的品種．

將動物致病菌的抗原基因?qū)�入馬鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動物獲得免疫力．以下是與植物疫苗制備過程相關(guān)的圖和表．

請根據(jù)以上圖表回答下列問題．
（1）在采用常規(guī)PCR方法擴增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶，其最主要的特點是．
（2）PCR過程中退火（復(fù)性）溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來設(shè)定．表1為根據(jù)模板設(shè)計的兩對引物序列，圖2為引物對與模板結(jié)合示意圖．請判斷哪一對引物可采用較高的退火溫度？．
（3）圖1步驟③所用的DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？．
（4）為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，圖1步驟⑥轉(zhuǎn)基因所用的細菌B通常為．
（5）對符合設(shè)計要求的重組質(zhì)粒T進行酶切，．假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據(jù)圖1中標示的酶切位點和表2所列的識別序列，對以下酶切結(jié)果作出判斷．
①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到種DNA片斷．
②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到種DNA片斷．

生物技術(shù)實踐
（1）商品化植酸酶主要來自微生物．在產(chǎn)酶菌株篩選過程中，常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生，可根據(jù)其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進一步測定植酸酶活性．活性測定可以植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時間表示．
（2）利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如圖：

Ⅰ中的主要成分為；Ⅱ中包含多種酸酶等多種蛋白質(zhì)．請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據(jù)．
（3）為建設(shè)基因工程菌，可用PCR等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因．PCR反應(yīng)包含多次循環(huán)，每次循環(huán)包括三步：．反應(yīng)過程中打開模板DNA雙鏈的方法是．
（4）除植酸酶外，微生物還應(yīng)用在的生產(chǎn)中．

登革熱病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人時將病毒傳染給人，可引起病人發(fā)熱、出血甚至休克．科學(xué)家用以下方法控制病毒的傳播．
（1）將S基因轉(zhuǎn)入蚊子體內(nèi)，使蚊子的唾液腺細胞大量表達S蛋白，該蛋白可以抑制登革熱病毒的復(fù)制．為了獲得轉(zhuǎn)基因蚊子，需要將攜帶S基因的載體導(dǎo)入蚊子的細胞．如果轉(zhuǎn)基因成功，在轉(zhuǎn)基因蚊子體內(nèi)可檢測出、和．
（2）科學(xué)家獲得一種顯性突變蚊子（AABB）．A、B基因位于非同源染色體上，只有A或B基因的胚胎致死．若純合的雄蚊（AABB）與野生型雌蚊（aabb）交配，F(xiàn)1群體中A基因頻率是，F(xiàn)2群體中A基因頻率是．
（3）將S基因分別插入到A、B基因的緊鄰位置（如圖），將該純合的轉(zhuǎn)基因雄蚊釋放到野生群體中，群體中蚊子體內(nèi)病毒的平均數(shù)目會逐代，原因是．

（生物一現(xiàn)代生物科技專題）
人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如圖：
請回答：
（1）過程①代表的是．
（2）過程②構(gòu)建A基因表過載體時，必須使用和兩種工具酶．
（3）過程③采用的實驗技術(shù)是，獲得的X是．
（4）對健康人進行該傳染病免疫預(yù)防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的所制備的疫苗．對該傳染病疑似患者確診時，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進行比較；或用圖中的進行特異性結(jié)合檢測．

家蠶細胞具有高效表達外源基因能力．將人干擾素基因?qū)�入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥．
（1）進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
（2）為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的和之間．
（3）采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細胞．改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、和．
（4）利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細胞時，的細胞會產(chǎn)生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于空氣交換．

酶解法制備原生質(zhì)體的原理是利用酶溶液對細胞壁成分的降解作用．蝸牛酶液從蝸牛（以植物為食）消化腺中提��；果膠酶、纖維素酶從微生物中提�。疄榱搜芯坎煌�酶液的酶解效果，某實驗小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實驗結(jié)果列于下表．請回答有關(guān)問題．

試管編號 項目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	V	Ⅵ
蒸餾水（mL）	2	O	1	1	1	1
緩沖液（mL）	0	2	1	0.5	0.5	0.5
果膠酶液（mL）	O	0	O	0.5	O	0
蝸牛酶液（mL）	O	0	O	O	0.5	0
纖維素酶液（mL）	0	O	0	O	0	0.5
實驗結(jié)果 （綠色深淺程度）	-	-	-	+++	++++	++

（注：“+”越多表示綠色越深，“一”表示顏色無顯著變化）
（1）實驗過程中，需要輕搖試管，其目的是，使原生質(zhì)體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺．
（2）從綠色的深淺可推測：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有  等多種酶．該實驗中 是空白對照組，其設(shè)置意義是．
（3）用網(wǎng)篩過濾原生質(zhì)體到離心管內(nèi)，離心后收集沉淀物，并用  洗滌．
（4）原生質(zhì)體是否符合要求還需進行檢驗，其檢驗的方法是．

2007年我國科學(xué)家率先完成了家蠶基因組精細圖譜的繪制，將13000多個基因定位于家蠶染色體DNA上，請回答以下有關(guān)家蠶遺傳變異的問題：
（1）在家蠶的基因工程實驗中，分離基因的做法包括用對DNA進行切割，然后將DNA片段與結(jié)合成重組DNA，再將重組DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌進行擴增等．
（2）家蠶的體細胞共有56條染色體，對家蠶基因組進行分析（參照人類基因組計劃要求），應(yīng)測定家蠶條雙鏈DNA分子的核苷酸序列．
（3）決定家蠶絲心蛋白H鏈的基因編碼區(qū)有16000個堿基對．其中有1000個堿基對的序列不編碼蛋白質(zhì)，該序列叫；剩下的序列最多能編碼個氨基酸（不考慮終止密碼子），該序列叫．
（4）為了提高蠶絲的產(chǎn)量和呂質(zhì)，可以通過家蠶遺傳物質(zhì)改變引起變異和進一步的選育來完成．這些變異的來源有．
（5）在家蠶遺傳中，黑色（B）與淡赤色（b）是有關(guān)蟻蠶（剛孵化的蠶）體色的相對性，黃繭（D）與白繭（d）是有關(guān)繭色的相對性狀，假設(shè)這兩對性狀自由組合，雜交后得到的子代數(shù)量比如下表：

子代 親本	黑蟻黃繭	黑蟻白繭	淡赤蟻黃繭	淡赤蟻白繭
組合一	9	3	3	l
組合二	O	1	0	l
組合三	3	O	l	O

①請寫出各組合中親本可能的基因型：
組合一：；  
組合二：；
組合三：．
②讓組合一雜交子代中的黑蟻白繭類型自由交配，其后代中黑蟻白繭的概率是．

濕地是地球上生物生產(chǎn)力最大的生態(tài)系統(tǒng)之一．它是天然的蓄水庫，并能過濾和分解水中的污染物進而改善水質(zhì)，被喻為’地球之腎”．濕地類型眾多，如紅樹林、河流、湖泊和稻田等．
（1）濕地由于其特殊的水文及地理特征，具有和等生態(tài)功能．
（2）在紅樹林等濕地生態(tài)系統(tǒng)中，碳元素主要通過：過程被固定在有機物中，并沿著進行傳遞．
（3）與生物多樣性豐富的湖泊相比，稻田的穩(wěn)定性較低．
（4）調(diào)查表明，我國相當一部分湖泊已不同程度富營養(yǎng)化，原因是含氮、磷等元素豐富的污染物的排放量超過了湖泊的限度，使其自動調(diào)節(jié)能力下降．富營養(yǎng)化水體中造成魚類大量死亡的原因有，等．

T-DNA可隨機插入植物基因組內(nèi)，導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變．用此方法誘導(dǎo)擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下：種植野生型擬南芥，待植株形成花蕾時，將地上部分浸入農(nóng)桿菌（其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因）懸浮液中以實現(xiàn)轉(zhuǎn)化．在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子（稱為T₁代）．
（1）為促進植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾，需要去除，因為后者產(chǎn)生的會抑制側(cè)芽的生長．
（2）為篩選出已轉(zhuǎn)化的個體，需將T₁代播種在含的培養(yǎng)基上生長，成熟后自交，收獲種子（稱為T₂代）．
（3）為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T₂代播種在含的培養(yǎng)基上，獲得所需個體．
（4）經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體．為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與植株進行雜交，再自交代后統(tǒng)計性狀分離比．
（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性．
（6）根據(jù)T-DNA的已知序列，利用PCR技術(shù)可以擴增出被插入的基因片段．其過程是：提取植株的DNA，用限制酶處理后，再用將獲得的DNA片段連接成環(huán)（如圖），以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取作為引物進行擴增，得到的片段將用于獲取該基因的全序列信息．